期刊简介
本刊1989年创刊,至今已17年。创刊以来,坚持明确的办刊宗旨,即传播医学信息,交流学术思想,探讨医学上的新理论、新方法、介绍防治工作中的经验,以临床普及为主,提高为辅,立足海南,面向全国,辐射海外,为发展我国医学事业,保护人民健康服务。
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- 杂志名称:海南医学杂志
- 主管单位:海南省卫生厅
- 主办单位:海南省医学会
- 国际刊号:1003-6350
- 国内刊号:46-1025/R
- 出版周期:半月刊
期刊荣誉:中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 万方收录(中)
VEGF111b的表达载体构建及抗体制备
李秀丽;谷芳;姚元庆;刘忠宇
关键词:VEGF111b, pcDNA3.1, 真核表达, 多克隆抗体
摘要:目的:克隆VEGF111b基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-VEGF111b,并进行测序,制备VEGF111b多克隆抗体。方法丝裂霉素C诱导处理卵巢癌SKOV3细胞24 h,设计VEGF111b酶切引物,以SKOV3细胞的cDNA为模板,通过PCR得到VEGF111b特异性基因产物,克隆入真核表达载体pcDNA3.1中,获得重组真核表达载体pcDNA3.1-VEGF111b,测序验证。用KLH耦联VEGF111b特异性短肽,制备多克隆抗体,Western blot检测其特异性。结果成功扩增了VEGF111b基因,双酶切、测序鉴定证实目的基因成功克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,测序结果与预测完全一致,成功制备了VEGF111b多克隆抗体,使用其多克隆抗体,Western blot能够检测到VEGF111b对应分子量的蛋白条带。结论本研究鉴定了pcDNA3.1-VEGF111b真核表达载体,并验证了VEGF111b多克隆抗体的特异性,为进一步研究VEGF111b蛋白的功能奠定了基础。
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