期刊简介
本刊1989年创刊,至今已17年。创刊以来,坚持明确的办刊宗旨,即传播医学信息,交流学术思想,探讨医学上的新理论、新方法、介绍防治工作中的经验,以临床普及为主,提高为辅,立足海南,面向全国,辐射海外,为发展我国医学事业,保护人民健康服务。
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- 杂志名称:海南医学杂志
- 主管单位:海南省卫生厅
- 主办单位:海南省医学会
- 国际刊号:1003-6350
- 国内刊号:46-1025/R
- 出版周期:半月刊
期刊荣誉:中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 万方收录(中)
TRPM8调控EMT促进人肾癌细胞A498迁移及侵袭的作用研究
黄维;陈洁仪;黄俊勇;周成宇
关键词:TRPM8, 肾癌, 侵袭, 迁移
摘要:目的:探讨瞬时受体电位M8(TRPM8)是否通过上皮-间充质转化(EMT)影响人肾癌细胞的侵袭及迁移能力。方法利用荧光定量PCR来检测人肾癌细胞A498、786-0以及GRC-1中TRPM8的表达水平;设计并合成靶向TRPM8的特异性shRNA,通过脂质体转染法转染TRPM8表达高的肾癌细胞A498以构建稳定低表达TRPM8细胞株,通过Western blot和定量PCR来验证shRNA的干扰效率;通过Transwell法检测干扰后细胞的迁移及侵袭能力,Western blot法检测EMT相关指标E-cadherin和N-cadherin以及其上游信号分子Snail和WNT-5a的变化。结果 TRPM8-shRNA转染后,能够有效抑制A498细胞中TRPM8的表达;Transwell法检测细胞侵袭能力结果显示,A498组、Control组和shRNA组的穿膜细胞数分别为(102.56±11.41)、(105.67±10.83)、(74.62±8.65),A498/shRNA组细胞侵袭能力受到显著抑制(F=49.105,P<0.01);Transwell法检测细胞迁移能力结果显示,A498组、Control组和shRNA组的穿膜细胞数分别为(115.45±10.31)、(109.33±7.53)、(76.21±13.28),A498/shRNA组细胞迁移能力受到显著抑制(F=36.168,P<0.01);Western blot法结果发现,TRPM8干扰组细胞的E-cadherin表达增加,N-cadherin的表达降低;此外,TRPM8干扰组细胞的Snail以及WNT-5a表达较对照组显著下降。结论运用RNA干扰技术能够有效沉默A498细胞的TRPM8基因,并诱导其迁移侵袭能力的下降,其可能的机制是通过调节EMT的上游信号分子Snail、WNT-5a的表达来调控EMT,从而影响肾癌细胞的迁移及侵袭。以上提示TRPM8在肾癌的发生发展中起重要作用,抑制TRPM8的表达可能成为一种治疗肾癌的新方法。
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