期刊简介
本刊1989年创刊，至今已17年。创刊以来，坚持明确的办刊宗旨，即传播医学信息，交流学术思想，探讨医学上的新理论、新方法、介绍防治工作中的经验，以临床普及为主，提高为辅，立足海南，面向全国，辐射海外，为发展我国医学事业，保护人民健康服务。
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- 杂志名称：海南医学杂志
- 主管单位：海南省卫生厅
- 主办单位：海南省医学会
- 国际刊号：1003-6350
- 国内刊号：46-1025/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录：上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 万方收录(中)
人MUC5AC启动子荧光报告基因的构建与分析
王孝芸；蓝楠；张沄；王星；李国平
关键词：MUC5AC, 启动子, 荧光报告基因, IL-4, IL-13
摘要：目的：构建人MUC5AC启动子荧光报告基因并进行分析。方法 PCR技术克隆人MUC5AC启动子[(-1300)~(+48) bp]长度片段的基因，将纯化的PCR产物与T载体连接，然后将连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，并利用酶切和测序进行重组质粒鉴定；将该重组质粒克隆至pGL3-ehancer荧光报告基因载体上，用脂质体转染法将荧光报告基因转染至人支气管上皮细胞(16HBE细胞)，分别用1 ng/mL的重组细胞因子IL-4和IL-13刺激细胞24 h，并设不做任何处理的对照组；用Promega双荧光素酶报告基因检测试剂盒检测相对荧光素酶活性(Rlus1/Rlus2)。结果人MUC5AC启动子荧光报告基因构建成功，IL-4和IL-13刺激组的相对荧光素酶活性均高于对照组[IL-4(21.6667±2.08167)，IL-13(26.5678±1.52753)，对照组(8.33±1.52753)；F=89.815，P=0.000]。结论 MUC5AC启动子核心区域为(-1300)~(+48) bp范围，IL-4和IL-13可作用于该区域并促进MUC5AC高表达。
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