期刊简介
本刊1989年创刊，至今已17年。创刊以来，坚持明确的办刊宗旨，即传播医学信息，交流学术思想，探讨医学上的新理论、新方法、介绍防治工作中的经验，以临床普及为主，提高为辅，立足海南，面向全国，辐射海外，为发展我国医学事业，保护人民健康服务。
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首页>海南医学杂志
- 杂志名称：海南医学杂志
- 主管单位：海南省卫生厅
- 主办单位：海南省医学会
- 国际刊号：1003-6350
- 国内刊号：46-1025/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录：上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 万方收录(中)
靶向S1PR3基因shRNA慢病毒表达载体构建及功能鉴定
王航；黄浩；蔡克银；丁世芳
关键词：慢病毒, 1-磷酸鞘氨醇受体3, 内皮祖细胞, 细胞迁移
摘要：目的：构建靶向小鼠S1PR3基因的shRNA慢病毒表达载体，并验证其对内皮祖细胞迁移能力的影响。方法依照shRNA设计原则，合成对应的shRNA序列，将其克隆到PHBLV载体中，使用三载体系统进行病毒包装，收集制备成功的病毒，并用荧光显微镜法测定病毒滴度，使用病毒感染EPC后，测定各组细胞中S1PR3蛋白表达情况，选择合适的病毒感染EPC后，测定其对EPC迁移能力的影响。结果成功将shRNA序列克隆到慢病毒表达载体PHBLV-U6-RFP，表达质粒与辅助质粒共转染293细胞后48 h就可以看到细胞中成功表达红色荧光。收集培养成功病毒感染小鼠EPC，可以不同程度干扰细胞中S1PR3蛋白表达，S1PR3蛋白表达受到抑制后，EPC的迁移能力明显减弱。结论我们成功构建了可以有效干扰S1PR3表达的慢病毒载体，并初步观察了其对EPC细胞的迁移能力的影响，为后续进一步调控S1PR3相关的细胞功能的研究奠定了基础。
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