期刊简介
本刊1989年创刊，至今已17年。创刊以来，坚持明确的办刊宗旨，即传播医学信息，交流学术思想，探讨医学上的新理论、新方法、介绍防治工作中的经验，以临床普及为主，提高为辅，立足海南，面向全国，辐射海外，为发展我国医学事业，保护人民健康服务。
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- 杂志名称：海南医学杂志
- 主管单位：海南省卫生厅
- 主办单位：海南省医学会
- 国际刊号：1003-6350
- 国内刊号：46-1025/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录：上海图书馆馆藏, 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 万方收录(中)
体外共培养模式下小胶质细胞影响内皮细胞紧密连接
廖宇洁；于晓彦；金轶平；朱皓皓
关键词：小胶质细胞, 内皮细胞, 紧密连接, 血-视网膜屏障, 肿瘤坏死因子-α
摘要：目的 探讨体外共培养模式下活化的小胶质细胞对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)紧密连接的影响.方法 原代培养大鼠视网膜小胶质细胞分成4组,分别用不同浓度的脂多糖(LPS)(0 ng/mL、10 ng/mL、100 ng/mL和1000 ng/mL)激活小胶质细胞24 h,通过ELISA检测LPS激活后小胶质细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平.小胶质细胞接种于Transwell的上室,用含100 ng/mL LPS的DMEM/F12培养24 h后用于实验.共培养体系作如下分组:A组,上室空白,下室HUVECs;B组,上室为未激活的小胶质细胞,下室HUVECs;C组,上室为用100 ng/mL LPS激活24 h的小胶质细胞,下室HUVECs.三组培养体系共培养24 h后,将HUVECs行细胞免疫荧光染色,观察claudin 1的表达,并行Western Blot检测claudin 1和occludin蛋白表达变化.结果 四组不同浓度的LPS(0 ng/mL、10 ng/mL、100 ng/mL和1000 ng/mL)激活小胶质细胞24 h后,小胶质细胞分泌TNF-α的水平不同,分别为(16.36±3.90)pg/mL、(378.46±11.46)pg/mL、(507.11±11.20)pg/mL、(754.55±53.43)pg/mL,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);小胶质细胞和HUVECs共培养24 h后,细胞免疫荧光染色显示C组HUVECs的claudin 1的表达较A组和B组减弱;Western Blot检测共培养体系A组、B组和C组的claudin 1和occludin相对蛋白量,claudin 1蛋白相对表达量在A组、B组和C组分别为0.233±0.010、0.244±0.010、0.171±0.001,occludin蛋白相对表达量在A组、B组和C组分别为0.474±0.045、0.323±0.029、0.139±0.017,三组间比较,claudin 1和occludin的相对蛋白量差异均有统计学意义(P<0.05),C组的claudin 1和occludin相对蛋白量下调.A组和B组claudin 1的表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 活化的小胶质细胞能产生大量的TNF-α,可能通过上调TNF-α的表达使HUVECs紧密连接蛋白的表达下调.
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